化学合成法

化学合成法通常是用焦磷酸或者磷酸的活性衍生物对核苷进行磷酸→酯化反应的方法。因为需要大量有机溶剂,存在环境污染及原料来源等问题，化学合成法在生产中也极少使用。

发酵法

发酵法生产鸟苷酸可分为2种方法：直接发酵法和发酵转化法。直接发酵法利用一定数量微生物，以葡萄糖为碳源进行发酵得到鸟苷酸，但此方法得到的鸟苷酸产量低，不能达到工业化要求。目前，运用最广泛的方法是发酵转化法，利用一定微生物，以多糖或葡萄糖作为碳源生产鸟苷，再利用生物或化学方法将其转化为鸟苷酸。一般都是先对枯草芽孢杆菌进行斜面培养、种子培养以及发酵培养获得鸟苷，再利用溶液与吡啶溶液制得鸟苷酸，反应式如图所示。

目前，我国鸟苷酸发酵得率较国外先进水平低，鸟苷酸工业化生产还未成熟，如何提高鸟苷酸产量成为研究的重中之重。